三伏贴通常贴敷于背部、腹部以及四肢等部位的特定穴位，具体位置需根据个人体质及治疗目的调整。贴敷前建议由专业医生辨证选穴，以确保安全性和有效性。
1、背部穴位
三伏贴常贴于背部膀胱经及督脉的穴位，如肺俞、定喘、大椎等。肺俞位于第三胸椎棘突下旁开1.5寸，定喘位于第七颈椎棘突下旁开0.5寸，这些穴位多用于呼吸系统疾病，如哮喘、慢性支气管炎。贴敷时需避开皮肤破损处，成人通常贴2-4小时。
2、腹部穴位
中脘、神阙、关元等腹部穴位常用于消化系统疾病的贴敷。中脘位于脐上4寸，神阙即肚脐中央，关元位于脐下3寸，这些穴位可调理脾胃虚寒引起的腹痛、腹泻。儿童贴敷时间需缩短至0.5-1小时，避免皮肤刺激。
3、四肢穴位
足三里穴、丰隆、三阴交等下肢穴位适用于增强免疫力或妇科调理。足三里穴位于外膝眼下3寸，丰隆位于小腿外侧外踝尖上8寸，这些穴位有助于祛湿化痰。上肢穴位如曲池则多用于退热，贴敷时应注意避开关节活动频繁区域。
三伏贴属于透皮给药的中医外治法，药物成分通过穴位渗透发挥作用。贴敷后若出现灼热感可提前去除，皮肤敏感者建议缩短贴敷时间。孕妇、发热患者及皮肤溃烂者禁用，贴敷期间需忌食生冷，建议在正规医疗机构操作。